pTHrP (1-37) 是一种与恶性高钙血症有关的甲状旁腺激素相关蛋白序列。
编号：200332
CAS号：206010-80-2
单字母：H2N-AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTAEIR-OH
pTHrP (1-37) is a parathyroid hormone-related protein sequence implicated in malignant hypercalcemia.
pTH-Related Protein (1-37) (human, mouse, rat) is a parathyroid hormone-related protein sequence associated with malignant hypercalcemia.
参考阅读
1.小鼠骨基质矿化的mkp1依赖性pph调制是成骨细胞成熟期特有的,涉及p-erk和p-p38MAPKS
Chandrika D Mahalingam, Bharat Reddy Sampathi, Sonali Sharma, Tanuka Datta, Varsha Das, Abdul B Abou-Samra, Nabanita S Datta J Endocrinol. 2013 Feb 25;216(3):315-29. doi: 10.1530/JOE-12-0372. Print 2013 Mar.
有关MAPK磷酸酶1(MKP1)在成骨细胞中的作用的信息有限。我们最近报道了MKP1在成骨细胞增殖、分化和对甲状旁腺激素(pth)的骨骼反应中的不同作用。在MKP1调节MAPK的磷酸化状态时,我们研究了P-ERK和P-P38MAPK在MKP1早期和成熟成骨细胞中的矿化作用和PTH反应。对9~14周大的小鼠和MKP1小鼠的头盖骨成骨细胞进行了检测。结果表明,在分化成骨细胞中,PERK和P38的下降及其持续表达与PP38的聚四氟乙烯治疗。早期成骨细胞接触p38抑制剂,sb203580(s),冯科斯法测定的男女成骨细胞中明显抑制矿化作用。在雄性成骨细胞中,ERK抑制剂U0126(U),而不是P38抑制剂(S),阻止了MTH对早期或成熟成骨细胞矿化的抑制作用。在高雌成骨细胞中,聚四氟乙烯能维持早期成骨细胞的矿化,降低成熟细胞的矿化。这种效应在早期成骨细胞中被S型抑制,而在成熟高分子细胞中被U型抑制。在高成骨细胞中,pth表达的基质GLA蛋白的变化与矿化没有关系,这表明mkp1依赖于pp1的额外机制是pth作用对成骨细胞矿化必不可少的。我们的结论是,在雌性小鼠中,骨母细胞矿化的pth调控是成熟阶段特有的,涉及到p-ERK和p-p38MAPKS的Mkp1调制。
2.甲状旁腺激素在小鼠成骨细胞中诱导有丝分裂原激活激酶磷酸酶1,主要通过坎普蛋白激酶A信号传递。
Tara L Aghaloo, Flavia Q Pirih, Andrew Shi, Olga Bezouglaia, Sotirios Tetradis J Periodontol. 2006 Jan;77(1):21-30. doi: 10.1902/jop.2006.77.1.21.
背景:甲状旁腺激素(pth)通过与pth受体1(pr1)结合来调节成骨细胞的功能,从而激活下游信号,从而诱导影响成骨细胞表型各方面的原发性反应基因的表达。我们以前在Mc3-T3-E1细胞中发现了PH诱导的PRG,包括使MAPK家族成员去磷酸化的有丝分裂蛋白激酶磷酸酶1(MKP1)。本研究的目的是探讨pth诱导小鼠成骨细胞Mkp1的分子机制。方法:用北方和西方的分析法测定MKP1的表达和蛋白表达。还进行了体内实验,以确定pth对小鼠颅脑和长骨Mkp1的影响。结果:成骨细胞在1小时后,最大限度地诱导10纳米PHP和PPS相关蛋白的MKP1mRNA水平。pth也提高了mkp1蛋白的表达,并诱导了mkp1mrna与新的蛋白合成无关。PT1触发蛋白激酶A(pka),pcc和钙通路。尽管pka和pgc激动剂诱导Mkp1mRNA水平,但只有循环性的腺苷3':5'-磷酸盐(CATA)-pka抑制抑制了p1诱导的mkp1mRNA水平。这些数据表明,PH诱导的mkp1mrna水平主要是通过坎普-pka途径介导的。此外,前列腺素E2(PGE2)激活坎普-Pka和PKC,诱导MKP1mRNA比PGF2阿尔法和氟丙烯醇(仅激活PKC信号信号)更大程度。最后,在0.5小时的时间内,pth最大限度地诱导小鼠头盖骨和长骨中的mkp1mrna水平。结论:Mkp1'在体外和体内对PT-目标组织的诱导表明它参与了pth对成骨细胞功能的一些影响。MKP1可能是pth对成骨细胞合成代谢效应中的一个重要靶基因。
3.甲状旁腺激素相关蛋白通过激活MKP1磷酸酶抑制含氮双磷酸盐诱导的牙周韧带成纤维细胞凋亡
Di Liu, Juan Du, Jing Sun, Minqi Li Bioengineered. 2021 Dec;12(1):1997-2006. doi: 10.1080/21655979.2021.1928930.
含氮双磷酸盐(BPS)大量生成人牙周韧带成纤维细胞活性氧种类(ROS)是引起颌骨骨组织性骨坏死的主要因素。ROS诱导成纤维细胞的氧化应激和凋亡与MAPK的活化密切相关。甲状旁腺激素相关蛋白通过调节MAPK磷酸酶1(MKP1)的水平,可以阻断MAPK的活性。因此,通过调节Mkp1的表达水平,推测PSPP能抑制含氮BP引起的Hpdlff的凋亡。本文分别以24小时、48小时和72小时的时间,对阿伦隆酸钠三水盐(含氮BP、FOS)和Hpdlff进行了共培养,并测定了ROS水平和凋亡水平。经过48小时的共同培养,FOS显著提高了ROS水平和凋亡水平,并发现P38、ERK1/2和P66Shc的高磷酸化水平。然而,P38和ERK1/2抑制剂显著降低了Hpdlff的凋亡。有意思的是,PSPP预处理显著降低了P38、ERK1/2和P66Shc的磷酸化水平。更重要的是,MKP1抑制剂血红蛋白抑制了P38、ERK1/2和P66Shc的脱磷酸化水平。通过激活MKP1磷酸酶,PSPP能够抑制含氮BP诱导的HPDLF凋亡。PSPP预处理显著降低了P38、ERK1/2和P66Shc的磷酸化水平。更重要的是,MKP1抑制剂血红蛋白抑制了P38、ERK1/2和P66Shc的脱磷酸化水平。通过激活MKP1磷酸酶,PSPP能够抑制含氮BP诱导的HPDLF凋亡。PSPP预处理显著降低了P38、ERK1/2和P66Shc的磷酸化水平。更重要的是,MKP1抑制剂血红蛋白抑制了P38、ERK1/2和P66Shc的脱磷酸化水平。通过激活MKP1磷酸酶,PSPP能够抑制含氮BP诱导的HPDLF凋亡。
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1177/0192623311399788 | PTHrP treatment fails to rescue bone defects caused by Hedgehog pathway inhibition in young mice | 下载 |
| 10.1126/science.3616618 | A parathyroid hormone-related protein implicated in malignant hypercalcemia: cloning and expression | 下载 |
多肽H2N-Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-Glu-Ile-Arg-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取1.0g CTC Resin（如初始取代度约为0.73mmol/g）和0.88mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入2.19mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Arg(Pbf)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取2.19mmol Fmoc-Ile-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入4.38mmol DIPEA，2.08mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
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H2N-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
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H2N-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
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Fmoc-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
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Fmoc-Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Arg(Pbf)-CTC Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-Glu-Ile-Arg-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。
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