Endomorphin 1，一种高度选择性的高亲和力μ-opioid受体激动剂 ， 对kappa3结合位点具有高亲和力 ，Ki为 20 到 30 nM 之间。
编号：118937
CAS号：189388-22-5
单字母：H2N-YPWF-CONH2
| 编号: | 118937 |
| 中文名称: | 内吗啡肽 1、Endomorphin 1 |
| 英文名: | Endomorphin 1 |
| CAS号: | 189388-22-5 |
| 单字母: | H2N-YPWF-CONH2 |
| 三字母: | H2N N端氨基：N-terminal amino group。在肽或多肽链中含有游离a-氨基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列时，通常将N端放在肽链的左边。 -TyrL-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -ProL-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -TrpL-色氨酸：tryptophan[e]。系统命名为(2S)-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸。是编码氨基酸，哺乳动物的必需氨基酸。符号：W，Trp。某些抗菌素中含有 D-色氨酸。 -PheL-苯丙氨酸：phenylalanine。系统命名为(2S)-氨基-3-苯基丙酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：F，Phe。 -CONH2C端酰胺化 |
| 氨基酸个数: | 4 |
| 分子式: | C34H38N6O5 |
| 平均分子量: | 610.7 |
| 精确分子量: | 610.29 |
| 等电点(PI): | - |
| pH=7.0时的净电荷数: | 1.97 |
| 平均亲水性: | -3.1 |
| 疏水性值: | -0.15 |
| 消光系数: | 6990 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 未分类肽 |
μ阿片类受体高度有效的选择性激动剂。
Endomorphin 1，一种高度选择性的高亲和力μ-opioid受体激动剂 ， 对kappa3结合位点具有高亲和力 ，Ki为 20 到 30 nM 之间。
Endomorphin 1, a high affinity, highly selective agonist of the μ-opioid receptor, displays reasonable affinities for kappa3 binding sites, with Ki value between 20 and 30 nM.
背景
Endomorphins有两种内源性阿片肽。Endomorphin-1(Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2)和Endomorphin-2(Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2)是μ阿片类受体的已知最高亲和力和特异性的四肽。Endomorphin-1位于孤束核、室周的下丘脑和背内侧下丘脑处，在内神经元中发现Endomorphin-1，它可能具有调节镇静剂和冲动行为的作用[1]。假设Endomorphins是一个大的前体的分裂产物，但是这种多肽或蛋白质尚未确定。后下丘脑存在Perikarya表达类EM2免疫反应性，而在后下丘脑和孤束核(NTS)中都存在表达类EM1免疫反应性。类EM1免疫反应性比类EM2免疫反应性更广泛而密集的分布于整个大脑，而类EM2免疫反应性比类EM1免疫反应性更普遍的分布于脊髓。Endomorphins参与调节疼痛和自主神经系统的进程及对压力的反应能力。
参考文献：
1. Greco, MA; Fuller, PM; Jhou, TC; Martin-Schild, S; Zadina, JE; Hu, Z; Shiromani, P; Lu, J (2008). "Opioidergic projections to sleep-active neurons in the ventrolateral preoptic nucleus". Brain Research 1245: 96–107.
Goldberg IE, et al. Pharmacological characterization of endomorphin-1 and endomorphin-2 in mouse brain. J Pharmacol Exp Ther. 1998 Aug;286(2):1007-13. : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9694962
Goldberg IE, et al. Pharmacological characterization of endomorphin-1 and endomorphin-2 in mouse brain. J Pharmacol Exp Ther. 1998 Aug;286(2):1007-13. : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9694962
多肽H2N-Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2的合成步骤：
1、合成MBHA树脂：取若干克的MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：
2、脱Fmoc：取2.94g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取2.65mmol Fmoc-Phe-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入5.29mmol DIPEA，2.51mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Phe-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Pro-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin
H2N-Pro-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Pro-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Tyr(tBu)-Pro-Trp(Boc)-Phe-Linker-MBHA Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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