OVA Peptide(257-264) 是 OVA 的 I 类 (Kb)-限制性肽表位，OVA 是由 I 类 MHC 分子 H-2Kb 呈递的来自卵清蛋白的八聚体肽。
编号：185811
CAS号：138831-86-4/1262751-08-5
单字母：H2N-SIINFEKL-OH
OVA Peptide(257-264) 是 OVA 的 I 类 (Kb)-限制性肽表位，OVA 是由 I 类 MHC 分子 H-2Kb 呈递的来自卵清蛋白的八聚体肽。
OVA Peptide(257-264) is a class I (Kb)-restricted peptide epitope of OVA, an octameric peptide from ovalbumin presented by the class I MHC molecule, H-2Kb.
OVA肽（257-264）TFA是OVA的I类（Kb）限制性肽表位，OVA是由I类MHC分子H-2Kb呈递的来自卵清蛋白的八聚体肽。OVA肽（257-264）表位对TAP转运蛋白具有差异依赖性，这取决于OVA表位的蛋白质环境：包含在MBPCrl OVA或Crl OVA细菌融合蛋白中的OVA肽，而全长卵清蛋白中所含的OVA肽（257-264）在很大程度上依赖于TAP转运蛋白，无论重组OVA是在细菌中表达还是天然蛋白与聚苯乙烯珠偶联。
OVA Peptide (257-264) TFA is a class I (Kb)-restricted peptide epitope of OVA, an octameric peptide from ovalbumin presented by the class I MHC molecule, H-2Kb. OVA Peptide (257-264) epitope is presented with a differential dependence on the TAP transporter depending on the protein context of the OVA epitope: OVA Peptide (257-264) contained within the MBPCrl-OVA or Crl-OVA bacterial fusion proteins is presented with little dependence on the TAP transporter, while OVA Peptide (257-264) contained within full-length ovalbumin is largely dependent on the TAP transporter, regardless of whether recombinant OVA is expressed in bacteria or the native protein is coupled to polystyrene beads.
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1002/eji.1830261135 | Major histocompatibility complex class I presentation of ovalbumin peptide 257-264 from exogenous sources: protein context influences the degree of TAP-independent presentation | 下载 |
| 10.1002/JLB.5A0122-027R | In vitro-induced Foxp3+ CD8+ regulatory T cells suppress allergic IgE response in the gut | 下载 |
| 10.1158/0008-5472.CAN-07-5769 | Impaired dendritic cell function in aging leads to defective antitumor immunity | 下载 |
| 10.1016/0264-410x(94)90013-2 | Vaccination with immunodominant peptides encapsulated in Quil A-containing liposomes induces peptide-specific primary CD8+ cytotoxic T cells | 下载 |
多肽H2N-Ser-Ile-Ile-Asn-Phe-Glu-Lys-Leu-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取1.56g CTC Resin（如初始取代度约为0.64mmol/g）和1.2mmol Fmoc-Leu-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入3.0mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Leu-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Leu-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取3.0mmol Fmoc-Lys(Boc)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入5.99mmol DIPEA，2.85mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
H2N-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
H2N-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
H2N-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
H2N-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Ile-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
H2N-Ile-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Ser(tBu)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Phe-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-CTC Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Ser-Ile-Ile-Asn-Phe-Glu-Lys-Leu-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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